蛋白質檢測六
蛋白印跡法 五 抗原 - 抗體 反應 1 儀器和設備 塑料盒、振蕩器。 2 封閉 一般采用 5% 脫脂奶粉進行封閉，室溫， 30-60min 。 * 封閉液的濃度可以是（ 1%-5% ），根據自己的條件摸索濃度就
蛋白質檢測十二
七、蛋白印跡實驗常見問題及原因分析 1. 沒有帶？ 原因：樣品中抗原含量不足（抗原表達量過低；蛋白降解；上樣量不足；樣品制備錯誤）；制膠濃度比例不合適；轉膜不完全；一抗
體外SUMO修飾實驗五
5. SUMO化蛋白的檢測 （1 ）培養細胞，待細胞融合至 90% 左右。 （ 2 ） PBS 洗滌細胞 2 次， 0.25% 胰酶消化細胞。 （ 3 ） 1000rpm ，離心 3-5min 收集細胞。 （4） PBS 洗滌細胞 2 次。 （5） 1
凝膠遷移或電泳遷移率實驗
凝膠遷移或電泳遷移率實驗（ EMSA ）是一種研究 DNA 結合蛋白和其相關的 DNA 結合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。通常將純化的蛋白或細胞粗提液和標記的 DNA 探針一同保
NFkB濾板法檢測試劑
核因子-kB（NF-kB）是一種轉錄因子，調控參與免疫反應、凋亡和細胞周期的基因表達。NF-kB可以由各種刺激物激活，這些刺激物有細胞因子、T、B細胞有絲分裂原、病毒蛋白、壓力誘導物。刺激導
單細胞實時熒光定量RT-PCR檢測試劑
為了便于單細胞基因表達研究，Signosis開發出一種基于SYBR green的單細胞實時熒光定量RT-PCR檢測試劑，該試劑可以使用細胞裂解液直接檢測基因表達水平，無需RNA制備過程。這個試劑盒提供了一種
免疫沉淀-蛋白印跡法
2.1. Material and reagents Duolbecco’s phosphate buffered saline (PBS), Medium 199 with Earle’s salts and 25mM HEPES, collagenase Type II (from Clostridum histolyticum), antibiotic/antimyotic solutuion (containing 10,000U penicillin, 10,000μg st
蛋白質染色實驗
凝膠中蛋白質的定位可用考馬斯亮藍染料染色或銀染色。前者簡便且快捷，而銀染法具有相當高的靈敏度，能用于檢出更少量的蛋白質。
重組大腸桿菌目的蛋白的表達蛋白電泳
第1次 菌體超聲破壁、離心、包涵體復性、 裝離子交換柱 第2次 測酶活、定蛋白離子交換層析 層析樣品進行濃縮、透析 第3次 濃縮、透析前、后樣品測活、定蛋白 裝分子篩柱 第
蛋白質檢測
蛋白印跡法 五 抗原 - 抗體反應 4 二抗的處理 （1） 常用二抗： HRP 偶聯二抗。也可用堿性磷酸酶標記二抗，但不夠靈敏。 （2） 二抗稀釋液： PBS/PBS-T 液、 TBS/TBS-T 液、一般的封閉液等
