蛋白質表達常見問題分析
影響蛋白表達有許多因素,如目的蛋白自身的特點,表達載體、表達菌株的組合,誘導表達的條件,培養基的選擇 等,都有可能對蛋白的表達產生影響。
操作篇:western blot 之發光鑒定
一般使用辣根過氧化物酶 HRP-ECL 發光法或堿性磷酸酶 AP-NBT/BICP 顯色法。
分光光度計維護方法說明
分光光度計是實驗室檢測核酸或者蛋白樣品濃度最常用的工具之一。
GST融合蛋白純化方法
GST融合蛋白純化方法
總蛋白定量分析方法中,就屬它們最酷
想要驗證細胞裂解是否成功? 進行總蛋白定量吧! 想將多個樣品進行平行實驗比較/標準化保存? 還是進行總蛋白定量吧!
ChIP染色質免疫沉淀技術3
細胞固定 甲醛能有效的使蛋白質-蛋白質,蛋白質-DNA,蛋白質-RNA交聯,形成生物復合體,防止細胞內組分的重新分布。甲醛的交聯反應是完全可逆的,便于在后續步驟中對DNA和蛋白質進行分析
ChIP染色質免疫沉淀技術 2
染色質免疫沉淀技術的原理是:在生理狀態下把細胞內的DNA與蛋白質交聯在一起,通過超聲或酶處理將染色質切為小片段后,利用抗原抗體的特異性識別反應,將與目的蛋白相結合的DNA片段沉
蛋白樣品制備中各類雜質和雜蛋白的去除
蛋白樣品制備中,在細胞破碎之后,既可以利用特定蛋白質的特性來分離某一類蛋白質,比如親和純化,比如前面介紹的磷酸化蛋白富集,或者膜蛋白富集;另外一個考慮方向是去除雜質----去
免疫共沉淀1
1.基礎成分 (1)Tris-HCl(防止蛋白變性的緩沖液成分) (2)NaCl(防止非特異性蛋白聚集的鹽分) (3)NP-40(用H2O配置成10%儲存液。NP-40為非離子去污劑,用于提取蛋白) (4)去氧膽
蛋白質分離純化的新技術及技術要點
本文主要介紹了濁點萃取法、置換色譜法、親和層析法、親和色譜法、凝膠電泳、雙水相萃取等蛋白質的最新分離純化技術,綜和近年來國內外的一些研究結果,結合實際應用的例子,分析了各