體外SUMO修飾實驗五
5. SUMO化蛋白的檢測 (1 )培養細胞,待細胞融合至 90% 左右。 ( 2 ) PBS 洗滌細胞 2 次, 0.25% 胰酶消化細胞。 ( 3 ) 1000rpm ,離心 3-5min 收集細胞。 (4) PBS 洗滌細胞 2 次。 (5) 1
凝膠遷移或電泳遷移率實驗
凝膠遷移或電泳遷移率實驗( EMSA )是一種研究 DNA 結合蛋白和其相關的 DNA 結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。通常將純化的蛋白或細胞粗提液和標記的 DNA 探針一同保
以新鮮動物組織為材料對細胞中酸性磷酸酶的定位
實驗方法與步驟: 1 動物新鮮組織低溫恒冷切片,片厚6μm,冷丙酮固定10min。 2 把切片置于酸性磷酸酶工作液中(預熱至37℃),37℃處理0.5-1h。 3 蒸餾水洗3次,每次1min。
99mTc-放射性藥物的穩定性測定
一、 試驗目的 通過制備各種 99mTc 配合物,了解并掌握配合物在體內穩定性的測定方法。 二、 實驗原理 穩定性測試的目的是考察藥物在溫度以及不同介質的影響下隨時間變化的規律,
直接免疫熒光法的注意事項
2 間接法又稱為熒光抗-抗體法 需要兩種抗體參與,即一抗和二抗(熒光素標記)。一抗對標本中的抗原來說起抗體的作用,但對熒光標記的二抗來說又起著抗原作用。 – 可用來檢測標本中未知
分子提取方法
ChIP 技術的應用 染色質免疫沉淀的 DNA 適用于多種分析方法
細胞中mRNA原位雜交技術(二)
實驗原理及技術背景二: 原位雜交可分為菌落原位雜交和組織原位雜交。菌落原位雜交是將細菌從培養平板轉移到硝酸纖維素濾膜上,然后將濾膜上的菌落裂解以釋放 DNA 。將 DNA 烘干
細胞中mRNA原位雜交技術(一)
實驗原理及技術背景二: 原位雜交可分為菌落原位雜交和組織原位雜交。菌落原位雜交是將細菌從培養平板轉移到硝酸纖維素濾膜上,然后將濾膜上的菌落裂解以釋放DNA。將DNA烘干固定
初代細胞培養實驗
初初代培養或原代培養,是從供體獲取組織后的首次培養。其最大優點是:組織和細胞剛剛離體,生物性狀尚未發生很大的變化,具有二倍體遺傳性狀,在供體來源充分、生物條件穩定的情況下
NFkB濾板法檢測試劑
核因子-kB(NF-kB)是一種轉錄因子,調控參與免疫反應、凋亡和細胞周期的基因表達。NF-kB可以由各種刺激物激活,這些刺激物有細胞因子、T、B細胞有絲分裂原、病毒蛋白、壓力誘導物。刺激導