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    【動物實驗】-主要組織相容性復合體單倍型鴨抗原處理相關轉運體單抗的制備

    目的:制備鴨抗原處理相關轉運體(TAP)特異性單抗,為深入利用實驗鴨開展免疫學研究提 供實驗材料?

    方法:利用大腸埃希菌誘導表達主要組織相容性復合體(MHC)單倍型 HBW-SPF鴨 TAP 蛋白 肽結合區片段,表達產物經鎳柱純化后免疫BALB/c小鼠,采用 ELISA 技術篩選特異性單抗分泌雜交瘤細胞 株? 將陽性細胞株制備小鼠腹水,作為一抗,與多次截短表達 TAP 蛋白肽結合區進行蛋白免疫印跡試驗,鑒 定單抗針對的抗原表位? 通過間接免疫熒光試驗比較該單抗對實驗鴨和雞外周血淋巴細胞的反應性,利用 免疫組織化學技術檢測對 SPF雞?SPF鴨?鵪鶉?鵝和 SPF 豬的特異性?

    結果:獲得一株鴨 TAP 單抗 1A6, 抗原表位位于297NARHQMLQQAVLDATAGTGMVVQEAI322,對雞和鴨外周血淋巴細胞具有免疫熒光反應性;在雞和 鴨的腸黏膜固有層檢測到大量特異性信號,在豬?鵪鶉和鵝沒有檢測到信號?

    結論:獲得了一株具有雞和鴨反應 性的抗原轉運相關體特異性的單抗,可運用于禽類實驗動物在禽病學和禽免疫學方面的研究?

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