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    大鼠疑似泰勒氏病毒熒光定量檢測方法的建立-【動物實驗】

    目的:臨床快速準確地檢測大鼠可疑的泰勒樣大鼠病毒(TLV),特別是通過TaqMan探針熒光定量聚合酶鏈反應(qPCR)技術檢測TLV病毒核酸,建立一種方法。

    方法:使用基因合成序列作為質粒標準品的模板,選擇3622-3729nt的特定序列,設計引物-TaqMan探針對,優化反應體系和條件,并進行qPCR擴增,建立TLV TaqMan。我們評估了探針qPCR方法及其靈敏度,穩定性和特異性。

    結果:已建立的TLVqPCR檢測方法與校正曲線具有良好的線性關系,R2值為0.99,靈敏度最低。它可以檢測10個拷貝/μL。這是常用的PCR方法;鼠病毒沒有非特異性反應,具有良好的可重復性,并且批內和批間變異系數小于1%。

    結論:TaqMan探針用于建立熒光定量PCR方法以快速檢測TLV。該方法易于操作,高度靈敏且高度特異性。

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