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    幼兔前交叉韌帶重建術后半腱肌的組織學變化-【動物實驗】

    背景:前交叉韌帶(ACL)在骨骼不成熟的運動員受傷的報道中經常增加,占膝關節損傷的31%。青年ACL重建仍在討論中。由于骨of損傷的風險,非手術治療是一種有吸引力的選擇。但是,最近的文獻一致表明,對兒童ACL破裂的保守治療會增加不穩定的發生率,并可能發展為關節內損傷,包括半月板破裂。進行早期外科手術治療以恢復ella骨的未成熟穩定性。盡管腱與韌帶相比具有不同的生物學和組織學特征,但是許多研究報告了韌帶腱修復的應用。仍然有爭議的問題之一是這種所謂的“新結合”實際上是如何逐漸失去肌腱和韌帶的組織學特征,并揭示出特定的生物學特征的。盡管有許多研究調查了成人ACL重建的各個方面。

    但是,關于未成熟的人類或動物骨骼患者的腱愈合過程的數據很少。一些動物研究表明,移植的肌腱實際上似乎已被重塑成韌帶ACL結構。兒童前交叉韌帶的重建需要保留骨the。手術應尊重前十字韌帶重建的生物學和生物力學,并盡量減少其影響下肢生長的潛力。對于未成熟骨骼的患者,已經提出了不同的肌腱和骨骼來進行術前十字韌帶重建,但是最常用的是半腱肌。這項研究的目的是評估半腱肌腱關節空間的形態和組織學變化,以重建兔子的前十字韌帶并保持其遠端插入。這項研究是對生長中的動物進行的,以確定病變的類型和程度。未成熟的動物更可能再生組織。

    方法:本實驗研究定性地解釋了用于幼兔前十字韌帶重建的半腱肌超精細結構的變化。該實驗已獲得當地倫理委員會的批準,并遵循了我們機構的動物保健和使用指南。術前給予抗生素阿莫西林(10 mg/kg),每隔72小時再給予兩次劑量,手術后2天繼續服用30 mg酮咯酸鎮痛藥。所有健康的兔子都參與了這項研究。排除標準是signs足,疼痛或其他疾?。ㄈ缁撔躁P節炎)的跡象。在右膝上操作二十只體重約1500±200g的新西蘭白兔,并用左膝進行比較。用地西epa(3-5 mg/kg)和氯胺酮(500 mg/kg)麻醉動物。右膝關節通過內側para骨旁切口暴露。 ACL將被完全移除,并且原始腳印將用無菌鉛筆標記。通過脛骨中央和股骨背韌帶的初始連接,在生長板中打開了直徑為2 mm的對角線隧道。半腱肌在近端肌肉和肌腱的交界處被切斷,但左脊附著在遠端。肌腱穿過脛骨和股骨之間的隧道,并用2號絲線縫合受傷的干physi端外側的骨膜。手術后,用石膏固定7天。盡一切努力減輕疼痛并避免勞累。手術后,這些動物回到了籠子里,可以自由進食。將動物隨機分為7組,每組3只,并在手術后1、4、6、8、12、24和48周處死。解剖每只動物的右后肢,并用卡尺和倫琴照片檢測出畸形和四肢長度不相等。左膝用于比較ACL的正常超精細結構。實驗組和對照組的標本用10%福爾馬林固定。然后使用EDTA進行脫鈣和石蠟包埋。用H&E,Masson Trichrome,Alcian-PAS等對5μm厚的切片進行染色。用光學顯微鏡評估樣品并分析植入物關節空間的變化。將所有標本與正常兔前交叉韌帶結構進行比較。

    結果:在整個研究中觀察到動物相關的并發癥。在評估時,所有移植物均完好無損,看起來不像常規ACL的珍珠。在動物死亡時未觀察到半腱肌移植失敗。手術后一周,移植的組織顯示局部無細胞壞死。 3-4周后,可以更好地評估組織壞死,例如強烈的炎癥反應。但是,在手術后40天內不再檢測到。術后一個月,大量成纖維細胞出現,大量膠原蛋白纖維隨機排列。 I型和III型纖維膠原蛋白為肌腱和韌帶的基本成分提供了彈性和強度。首先將成纖維細胞縱向放置在肌腱中央。血管仍然較差,并且血管在移植物周圍。半腱肌肌肉成纖維細胞呈紡錘形,與前十字韌帶成纖維細胞不同。但是,在4周后,這些紡錘體細胞變得更加圓潤。第一個月后,膠原纖維無序排列,膠原纖維更組織。手術后4-8周內,典型的炎癥細胞逐漸消失。未檢測到壞死區域。手術八周后,將膠原纖維與新形成的毛細血管平行放置,并成為高度分化的成纖維細胞。半腱肌腱最初在移植后脫血管,并逐漸變為血管,尤其是在40天后。但是,此時的端口看起來并不像ACL。手術膝關節的平均移植物橫截面積顯著高于正常左膝韌帶的平均移植物橫截面積。在新韌帶的愈合過程中(24周),正常的膠原蛋白取向和卷曲模式會隨著膠原蛋白纖維直徑的變化而消失。從大到小,I型膠原纖維減少,III型膠原合成增加。 24周后處死的動物的組織學特征在48周內沒有進一步改變。在24-48周內,移植物尚未獲得關節腔中正常兔子ACL的特性。

    結論:未成熟的兔子直到手術后48周才形成結扎過程。移植的ST在腱和韌帶之間具有微結構,這使其在愈合過程中成為新的實體。半腱肌移植不能完全恢復完整ACL的生物學特性,而是需要經過一個適應性過程。

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